浓缩胶和分离胶的作用分别是什么

2022-06-07 04:29 综合科普 3958阅读 投稿:知识库
最佳答案1、浓缩胶的作用:浓缩胶有堆积作用。带电荷的蛋白质或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小,移动速度快,当接近小孔径的分离胶时,遇到的阻力大,移动速度减慢而使样品浓缩,形成一条狭

1、浓缩胶的作用:浓缩胶有堆积作用。带电荷的蛋白质或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小,移动速度快,当接近小孔径的分离胶时,遇到的阻力大,移动速度减慢而使样品浓缩,形成一条狭窄区带,以减少电泳过程中的谱带扩散。

2、分离胶的作用:蛋白质或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶,由于分子筛作用,小分子的物质容易通过,阻力小,迁移速度快;大分子的则受到较大的阻力而被滞后。

浓缩胶:

浓缩胶有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。

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