4种说法：一说是一位名叫伊莎贝拉的妙龄少女；一说是有着“悍妇”之称的意大利传奇女子斯福尔扎；一说是达·芬奇的一幅自画像；还有一种近年来较多专家认可的说法，认为其原型是达·芬奇父亲好友的妻子丽莎·格拉迪尼。
《蒙娜丽莎》中那个拥有神秘微笑的女子的原型到底是谁？500多年来，人们一直为此争论不休。
有人认为蒙娜丽莎的原型可能是一位名叫伊莎贝拉的妙龄少女，据说她相貌娇美、体态丰盈，特别适合当模特儿。美中不足的是她的牙齿不仅黄黑，而且牙缝很宽，所以伊莎贝拉总不敢对着别人咧嘴笑。她万万没想到自己极力控制的笑容，在达•芬奇的笔下成为经典，使无数人为之倾倒。
有人认为蒙娜丽莎的原型是有着“悍妇”之称的意大利传奇女子斯福尔扎。斯福尔扎是米兰公爵的私生女，不仅长得漂亮，而且还非常勇敢。据考证，克雷迪所画的25岁的斯福尔扎，其傲然的神态、双手的摆法与神秘的笑容，与达•芬奇画的蒙娜丽莎如出一辙。研究人员在对比画中人物的五官结构后，更确信蒙娜丽莎就是斯福尔扎。
有人认为蒙娜丽莎其实是达•芬奇的一幅自画像。假如在计算机上把蒙娜丽莎的像与达•芬奇的一幅自画像重叠在一起的话，会发现两幅像的面部如出一辙。但反对者表示，这个结果只不过是同一个画家采用同一种画风造成的。
一位名叫吉乌赛普•帕兰蒂的学者对佛罗伦萨市档案进行了长达25年的研究后得出一个结论：蒙娜丽莎的原型名叫丽莎•格拉迪尼，她是佛罗伦萨一位名叫弗兰西斯科•吉奥康杜的丝绸商的妻子，他们共育有5个子女。吉奥康杜是达•芬奇父亲皮耶罗的好友。蒙娜丽莎的画像完成于格拉迪尼24岁那年。当时达•芬奇正被一场财务纠纷困扰，皮耶罗为了帮助达•芬奇，自己出钱安排达•芬奇为朋友的妻子画了这幅画。帕兰蒂指出，皮耶罗曾不止一次以类似的方式帮助过达•芬奇。
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