三叶草喜温暖、向阳的环境和排水良好的粉砂壤土或粘壤土。适应性广，海拔适应范围为500米至3600米，在pH5.5至7的土壤中都能生长。
耐寒、耐热、耐霜、耐旱、耐践踏。不耐阴，在盐碱土中不适应。
三叶草是一种匍匐生长型的多年生牧草，喜欢温凉、湿润的气候，最适生长温度为16度至25度，适应性比其他三叶草广，耐热耐寒性比红三叶及绛三叶强，适应亚热带的夏季高温，在东北、新疆有雪覆盖时，均能安全越冬。
较耐荫，在部分遮荫条件下生长良好。对土壤要求不高，耐贫瘠、耐酸，最适排水良好、富含钙质及腐殖质的粘质土壤，不耐盐碱。
